Plasma/Serum RNA/DNA Purification Mini Kit  

Norgen社Plasma/Serum RNA/DNA Purification Mini Kitの使用手順フローチャート。

図1.　血漿サンプル量の違いによるRNA量の比較。EDTA処理した血漿サンプル（50μL, 100μL, 200μL）から血液循環RNAを精製した。精製RNAを鋳型にmiR-21(図1A)およびハウスキーピング遺伝子5s rRNA（図1B）をRT-PCRによって測定した。miR-21および5s rRNAの転写産物はサンプル量に応じて直線的に増加した。

図2.　溶出バッファー量の違いによるRNA抽出効率の検討。EDTA処理した血漿サンプルを200μL用いて、異なる溶出容量（10μL，15μL，25μL）によってRNA抽出を行った。 精製RNAを鋳型にmiR-21（図2A）およびハウスキーピング遺伝子5s rRNA（図2B）についてRT-PCRによって測定した。 溶出バッファーの量を減らすことによって、いずれのRNAについても効率よく濃縮できた。

図3. 他社製品との比較。図3A．Norgen（NOG）社キットおよび各社RNA精製キットを用いて精製したRNAを鋳型にmiR-21についてRT-PCRを行った。NOG社キットは他社品と比較して高効率で分離・精製することがわかる。
図3B．NOG社キットおよび各社DNA精製キットを使用して精製したDNAを鋳型に5S rRNA 遺伝子について定量PCRを行った。NOG社キットは他社品と比較して高効率で分離・精製することがわかる。

図4. PCR反応を阻害する夾雑物の影響。Norgen（NOG）社キットおよび各社DNA精製キットから抽出したDNAについて、異なる鋳型量(3μL, 6μL, 9μL)を用いて5S rRNA遺伝子を定量的PCRで測定した。鋳型量を増やした際のCt値の上昇は、PCR阻害を起こす夾雑物の増加が影響している。NOG社キットでは、鋳型量を増やした場合においても、PCR反応への影響は見られなかった。

Norgen社Plasma/Serum RNA/DNA Purification Mini Kit。