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反応回路図:重要な基質成分であるNADPHを、APが入っているウェルに添加すると、リン酸基の放出を介してNADHに還元されます。反応が進行すると、検体と結合したAPコンジュゲートの量に比例して、NADHが蓄積されます。増幅試薬を添加すると、この一番目の反応が抑制され、NADHは二番目の酸化還元酵素系に供給されます。ジアホラーゼはNADHを利用して、ヨードニトロテトラゾリウム塩をホルマザン(紫色)に還元し、NAD+を産生します。次に、NAD+がNADHに還元される逆の酵素反応が起こり、エタノールはアルコール脱水素酵素を介してアセトアルデヒドに酸化されます。この酵素反応セットが進行すると、NADHが再利用されて元のAP/基質反応を増幅します。発色の強度は最終的に結合した検体の量に比例します。
代表的なアルカリホスファターゼ力価 従来のpNPP基質 (405 nm) またはENZ社 シグナル増幅試薬 (495 nm)を使用して、AP力価のシグナルを測定した。新しいシグナル増幅システムでは、感度が10倍まで向上した。
HSP70高感度キット標準曲線の検出方法の比較 標準的なENZ社 HSP70高感度ELISAキット(品番:ADI-EKS-715)、および Amp’d? HSP70高感度ELISAキット(品番:ENZ-KIT-101)を使用して、標準曲線を作成・分析した。新しいAmp’d? 検出システム(Amp’d? ELISA シグナル増幅キット(品番:ENZ-KIT-100)がベース)は高感度なため、低濃度の内在性HSP70サンプルをより確実に分析できる。
ワークフロー
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