Anti Rad51  

図1．HeLa細胞粗抽出中のRad51タンパク質の本抗体を用いたウェスターンブロットによる検出。10 ugのHeLa細胞粗抽出液を用い、抗体は1/1,000希釈して使った。２次抗体としてHRPコンジュゲートした抗ウサギIgGヤギ抗体を1/20,000希釈で用いた。

図2．抗Rad51 抗体によるHeLa細胞の粗抽出物からのRad51タンパク質の免疫沈降。
抗Rad51 抗体(20 ug)をHeLa細胞抽出物(20 μg)とインキュベートし、proteinA -ビーズ20 μgで沈殿させた。サンプルはSDS-サンプルバッファー中で加熱して可溶化し、1/1,000の希釈した抗Rad51 抗血清(ニワトリ)を用いてウエスタンブロット法にて解析した。２次抗体として抗ニワトリIgG抗体(ウサギ)は、1/10,000の希釈で使用した。

図3．ヒト線維芽細胞GM0637中にX線照射後に形成されたRa51フォーカスの検出.
細胞をX線で2 Gy 照射後１時間培養し、4%パラホルムアルデヒド（PBS中）で10分間固定した。次に3回、1x PBSで3分間洗浄し、0.5%Tritonで５分間透過処理し、PBSで3分間３回洗浄した後、30分間 37Cで抗Rad51 抗体とインキュベートし、PBSで3分間３回洗浄した。次に30分間 37Cで二次抗体とインキュベートし、3分間PBSで３回洗浄し、1分間ヘキストで染色して、マウントした。
抗Rad51 抗体は、1/10,000の希釈(左側のパネル)および1/1,000の希釈(右側のパネル)で使用した。二次抗体として、抗ウサギAlexa488は、1/10,000の希釈で使用した。写真は、広島大学田代教授と河野博士からご提供された。