CHEMILUM DE LYS(R) HDAC/SIRT Chemiluminescentdrug discovery kit

図1 ルシフェラーゼベースアッセイでみられる干渉を削除
化合物PTC124はATP存在下でルシフェラーゼによって高親和性の多基質付加体阻害剤、PTC124-AMPに変換されます。1 μMよりも高濃度のPTC124ではルシフェラーゼベースのアッセイを阻害するが、Chemilum-de-LysRアッセイでは影響がない。

図2 界面活性剤への低干渉
各サンプル（HeLa核抽出物、酵素なし、0.1% CHAPS処理済み1.5×105 3T3細胞）で本アッセイを行った。HDAC反応はトリプシン処理に続き、25 μM Chemilum-de-LysR基質（37℃、60分）で行われた。

図3 　高い再現性による一貫した結果
一貫性の評価としてZ -f a c t o r解析を行った。H e L a核抽出物（40）（赤色の四角）、バッファー（青色のひし形）を、25μM Chemilum-de-LysR基質を加え、24℃、120分インキュベートした。反応をマニュアルに記載されている通りに停止した。
エンハンサーを加え、化学発光を計測した。
破線は標準偏差を示す。